آموزش تولید و پرورش قارچ

بررسی مشکلات کشت آگار در پرورش قارچ

آموزش پرورش قارچ با آگار و مشکلات مربوط به کشت آگار

بررسی مشکلات کشت آگار در پرورش قارچ، اگر شما هم از علاقه‌مندان به صنعت قارچ و تولید بذر مناسب برای پروش قارچ خوراکی هستید، حتما نام آگار را شنیده‌اید. اگر هم نشنیدید، نگران نباشید! ما در این مقاله تصمیم داریم به شما کمک کنیم تا با این ماده و کاربرد آن بیشتر آشنا شوید.

آگار چیست؟

آگار از یک جلبک قرمز به دست می‌آید که در زبان مالایی به نام آگار شناخته می‌شود. از این ماده ژله مانند به عنوان ماده‌ای در دسرها، ملین، اشتها آور، تثبیت کننده در مربا، کنسرو، بستنی و به عنوان یک عامل شفاف‌کننده در دم‌کردن استفاده می‌شود.

به دلیل منشا گیاهی آن، بسیاری از افرادی که به رژیم‌های گیاهخواری علاقه‌مند هستند از آن به عنوان جایگزینی مناسب به جای ژلاتین حیوانی استفاده میکنند.

تاریخ استفاده از آن به سال 1658 باز میگردد که یک فرد ژاپنی به نام مینو تاروزامون از آن در سوپ جلبک دریایی استفاده کرد و متوجه شد که سوپ او شبیه به  ژله شده است.

از این ماده در  اواخر قرن نوزدهم به عنوان یک محیط جامد برای کشت میکروبیولوژی استفاده ‌شد که اولین بار میکروبیولوژیست آلمانی والتر هسه پس از پیشنهاد همسرش فانی هسه، آن را در سال 1882 به این منظور به کار گرفت.

چرا از آگار برای پرورش قارچ استفاده کنیم؟

از این ماده در پرورش قارچ به منظور نگهداری بذرها برای استفاده طولانی مدت و ایجاد تک کشت‌های عاری از آلودگی استفاده می‌شود. توصیه می‌شود قبل از استفاده، هاگ‌ها را روی آگار جوانه بزنید.

هاگ‌ها اغلب با عوامل بیماری‌زا مانند مخمر و کپک همراه هستند. با کشت میسلیوم بر روی این صفحات، می‌توان به راحتی آلاینده‌ها را شناسایی کرد و با کولتیواتور هاگ‌های مورد نظر را به صفحه آگار جدید انتقال داد.

به علاوه از آن برای ساخت کلون‌های قارچی نیز استفاده می‌شود. یک قطعه تمیز از بدن میوه‌دهی قارچ را می‌توان روی آگار قرار داد تا به‌جای جوانه‌زنی هاگ رشد کند.

 به چه چیزهایی نیاز داریم؟

اگر بخواهیم حدود 20 بشقاب را آماده کنیم، به وسایل زیر نیز داریم:

  • 10 گرم آگار (پودر آگار آگار ممتاز برای پرورش قارچ)
  • 10 گرم عصاره مالت سبک
  • 500 میلی لیتر آب
  • 20 ظرف پتری
  • یک عدد بطری یا شیشه

چگونه با آگار قارچ پرورش دهیم؟

روش کار بسیار ساده است و ما آن را در چند مرحله برای شما توضیح داده‌ایم:

مرحله 1. وزن مواد خشک

با استفاده از ترازوهای دقیق عصاره مالت سبک و پودر آگار را وزن کنید. مواد خشک را به ظرف مقاوم در برابر حرارت اضافه نمایید.

مرحله 2. آب جوش را اندازه بگیرید

آب گرم را با استفاده از ترازو آشپزخانه بر حسب گرم اندازه بگیرید. به ظرف حاوی مواد خشک اضافه کنید و خوب هم بزنید تا حل شود.

مرحله 3. آگار را استریل کنید

مخلوط حل شده و عصاره مالت سبک را برای استریل کردن در بطری بریزید. درب بطری‌های رسانه‌ای را قرار دهید.  مخلوط آگار را به مدت 20 دقیقه با 15PSI استریل کنید. قبل از باز کردن زودپز، اجازه دهید فشارش کاملا کم شود یا حداقل 1 ساعت صبر کنید.

مرحله 4. خنک سازی آگار

بطری مخلوط آگار داغ را در یک حمام آب گرم قرار دهید. برای کنترل دما از دماسنج استفاده کنید. این مخلوط  همان دمای حمام آب را اندازه گیری می کند. قبل از ریختن صفحات، آن را تا 55 درجه سانتیگراد خنک کنید.

مرحله 5. ریختن آگار

با استفاده از تکنیک آسپتیک، فضای کار را برای ریختن صفحات آماده کنید. قبل از برداشتن درب مخلوط به طور ذهنی تمرین کنید تا مطمئن شوید که کار به سرعت و به طور موثر انجام می شود.

ظروف پتری را به ارتفاع 5 بشقاب روی هم قرار دهید. درب مخلوط را بردارید. با ریختن صفحه پایین روی پشته شروع کنید و درب آن را با 4 بشقاب خالی اضافی بردارید.

این عمل را با کار کردن هر پشته تکرار کنید. در هر بشقاب تقریباً 20 میلی لیتر آگار بریزید.

مرحله 6. مهر و موم و ذخیره

صفحات آگار سرد شده و سفت شده را می توانید با استفاده از پارافیلم یا پوشش پلاستیکی آب بندی کنید. بشقاب‌های استفاده نشده را می توان تا زمان استفاده در یخچال نگهداری کرد.

نکته مهم، نیاز به جریان هوای بسته

استفاده از هود جریان آرام برای تولید صفحات آگار مفید است. محیط‌های استریل شده به شدت مستعد آلودگی هستند. در صورت عدم وجود هود جریان، کلیه انتقالات استریل باید در یک فضای بسته با حداقل جریان هوا مانند حمام انجام شود.

برای تهیه انواع تجهیزات لازم  می‌توانید به فروشگاه هاگ مارکت مراجعه نمایید.


بررسی مشکلات کشت آگار

آگار در پرورش قارچ به منظور نگهداری اسپان قارچ برای استفاده طولانی مدت و ایجاد تک کشت‌های عاری از آلودگی استفاده می‌شود.

ممکن است در هنگام استفاده از آن با مشکلات متعدد روبرو شوید. ما فهرستی از مشکلات احتمالی و روشهای برطرف کردن آن را برای شما آورده‌ایم تا بتوانید از ابتلا به آن جلوگیری کنید.

موضوع علت اصلی مشکل ارائه راه حل
الف) سفت نشدن محیط کشت آگار ·   توزیع نامناسب اگار ·   به هم زدن کامل محیط کشت آگار قبل از ریختن آن داخل پتری دیش ها
ب ) لبریز شدن آگار از ظرف حاوی آن ·   خروج زیاد بخار از اتوکلاو ·   قبل از رسیدن فشار اتوکلاو به یک پوند ، سوپاپ آن را برندارید و برای درزبندی منافذ اتوکلاو، لایه نازکی از نخ نسوز و گریس استفاده شود تا بخار از اتوکلاو نشست نکند
پ ) شیوع آلودگی در پتری دیش ها بعد از ریختن آگار و قبل از تلقیح ·   بالا بودن آلودگی محیط آزمایشگاه

·   نامناسب بودن روش آماده سازی محیط کشت

·   آلوده بودن اتوکلاو به بیماری باکتریایی

·   ضدعفونی و پاستوریزه نمودن آزمایشگاه بذر

·   خنک شدن اتوکلاو حاوی محیط کشت در وضعیت استریل ، قبل از باز کردن درب آن

·   استریل کردن اتوکلاو به مدت ۴۸ ساعت در فشار ۱۵ پوند

ت ) عدم رشد هاگ های انتقال یافته ·   معیوب بودن نوع محیط کشت

·   PH نامناسب

·    هاگ‌های مسن یا خشکیده

·   داغ بودن چاقوی جراحی یا حلقه تلقیح

·   قهوه‌ای شدن شکر در محیط کشت

·   تهیه کشت مناسب

·    مناسب بودن محیط کشت دارای PH (بسته به نوع قارچ)

·   خیس نمودن هاگ ها به مدت 24 ساعت در آب استریل

·    خنک کردن ابزار قبل از تماس با هاگ

·   کاهش دادن دما و فشار اتوکلاو تا حد مجاز

ث ) بروز آلودگی در اطراف نقطه تماس نشاء بر روی محیط آگار ·   هاگ تلقیح شده آلوده باشد

·   ابزار تلقیح استریل نباشد

·   استفاده از هاگ های سالم و گرفتن بافت از نمونه تازه تر و کاملاً استریل

·   قبل از استفاده  ابزار کار را اتوکلاو نموده، به الکل آغشته کرده و روی شعله بگیرید

ج ) پنبه ای شدن میسلیوم ریزومورفی و کم شدن رشد و باردهی آن ·   استفاده از هاگ قارچ

·   عامل ژله ای ناکافی که باعث می شود تا میسلیوم ها به طور زیر سطحی رشد کرده و در ظاهر پنبه ای شوند

·   انتخاب بهترین نژاد

·   آگاربا کیفیت اضافه کرده و یا قبل از ریختن آن درون پتری دیش ها، آگار کاملاً به هم زده شود

چ) شکستن بطری های شیشه ای اسپان در زمان باز شدن اتوکلاو ·   خنک شدن سریع اتوکلاو و تغییر ناگهانی دمای آن

·   بطری ها خیلی نزدیک هم چیده شده اند

·   معیوب یا ترک دار بودن بطری‌ها نامناسب بودن بطری ها

·   کاهش دمای اتوکلاو به صورت تدریجی

·   ایجاد فاصله بین بطری ها

·   استفاده از بطری های شکسته و جایگزین کردن بطری های سالم

·   تهیه بطری هایی با کیفیت عالی

امید است مقاله بررسی مشکلات کشت آگار مورد توجه شما قرار گرفته باشد.اگر نیازمند اطلاعات بیشتری در زمینه آموزش تولید و پرورش قارچ هستید می‌توانید به همین بخش مراجعه نمایید.

 

امتیاز دهید

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

دکمه بازگشت به بالا