بررسی مشکلات کشت آگار در پرورش قارچ
بررسی مشکلات کشت آگار در پرورش قارچ، اگر شما هم از علاقهمندان به صنعت قارچ و تولید بذر مناسب برای پروش قارچ خوراکی هستید، حتما نام آگار را شنیدهاید. اگر هم نشنیدید، نگران نباشید! ما در این مقاله تصمیم داریم به شما کمک کنیم تا با این ماده (اگار پلیت)، کاربرد و محیط کشت آگار بیشتر آشنا شوید.
آگار چیست؟
برای بررسی مشکلات کشت آگار اول باید با این ماده آشنا شویم. آگار از یک جلبک قرمز به دست میآید که در زبان مالایی به نام آگار شناخته میشود. از این ماده ژله مانند به عنوان مادهای در دسرها، ملین، اشتها آور، تثبیت کننده در مربا، کنسرو، بستنی و به عنوان یک عامل شفافکننده در دمکردن استفاده میشود.
به دلیل منشا گیاهی آن، بسیاری از افرادی که به رژیمهای گیاهخواری علاقهمند هستند از آن به عنوان جایگزینی مناسب به جای ژلاتین حیوانی استفاده میکنند.
تاریخ بکارگیری از آن به سال 1658 باز میگردد که یک فرد ژاپنی به نام مینو تاروزامون از آن در سوپ جلبک دریایی استفادهکرد و متوجهشد که سوپ او شبیه به ژله شدهاست.
از این ماده(اگار پلیت) در اواخر قرن نوزدهم به عنوان یک محیط جامد برای کشت میکروبیولوژی استفاده شد که اولین بار میکروبیولوژیست آلمانی والتر هسه پس از پیشنهاد همسرش فانی هسه، آن را در سال 1882 به این منظور به کار گرفت.
چرا از آگار برای پرورش قارچ استفاده کنیم؟
از این ماده در پرورش قارچ به منظور نگهداری بذرها برای استفاده طولانی مدت و ایجاد تک کشتهای عاری از آلودگی استفاده میشود. توصیه میشود قبل از استفاده، هاگها را روی آگار جوانه بزنید.
هاگها اغلب با عوامل بیماریزا مانند مخمر و کپک همراه هستند. با کشت میسلیوم بر روی این صفحات، میتوان به راحتی آلایندهها را شناسایی کرد و با کولتیواتور هاگهای مورد نظر را به صفحه آگار جدید انتقال داد.
به علاوه از آن(اگار پلیت) برای ساخت کلونهای قارچی نیز استفاده میشود. یک قطعه تمیز از بدن میوهدهی قارچ را میتوان روی آگار قرار داد تا بهجای جوانهزنی هاگ رشد کند.
به چه چیزهایی نیاز داریم؟
اگر بخواهیم حدود 20 بشقاب را محیا کنیم، به وسایل زیر نیز داریم:
- 10 گرم آگار (پودر آگار آگار ممتاز برای پرورش قارچ)
- 10 گرم عصاره مالت سبک
- 500 میلی لیتر آب
- 20 ظرف پتری
- یک عدد بطری یا شیشه
چگونه با آگار قارچ پرورش دهیم؟
روش کار بسیار ساده است و ما آن را در چند مرحله برای شما توضیح دادهایم:
مرحله 1. وزن مواد خشک
با استفاده از ترازوهای دقیق عصاره مالت سبک و پودر آگار را وزن کنید. مواد خشک را به ظرف مقاوم در برابر حرارت اضافه نمایید.
مرحله 2. آب جوش را اندازه بگیرید
آب گرم را با استفاده از ترازو آشپزخانه بر حسب گرم اندازه بگیرید. به ظرف حاوی مواد خشک اضافه کنید و خوب هم بزنید تا حل شود.
مرحله 3. آگار را استریل کنید
مخلوط حلشده و عصاره مالت سبک را برای استریلکردن در بطری بریزید. درب بطریهای رسانهای را قرار دهید. مخلوط آگار را به مدت 20 دقیقه با 15PSI استریل کنید. قبل از باز کردن زودپز، اجازه دهید فشارش کاملا کم شود یا حداقل 1 ساعت صبر کنید.
مرحله 4. خنک سازی آگار
بطری مخلوط آگار داغ را در یک حمام آب گرم قرار دهید. برای کنترل دما از دماسنج استفاده کنید. این مخلوط همان دمای حمام آب را اندازه گیری می کند. قبل از ریختنصفحات، آن را تا 55 درجه سانتیگراد خنک کنید.
مرحله 5. ریختنآگار
با استفاده از تکنیک آسپتیک، فضای کار را برای ریختنصفحات آمادهکنید. قبل از برداشتن درب مخلوط به طور ذهنی تمرین کنید تا مطمئن شوید که کار به سرعت و به طور موثر انجام می شود.
ظروف پتری را به ارتفاع 5 بشقاب روی هم قرار دهید. درب مخلوط را بردارید. با ریختنصفحه پایین رویپشته شروع کنید و درب آن را با 4 بشقاب خالی اضافی بردارید.
این عمل را با کار کردن هر پشته تکرار کنید. در هر بشقاب تقریباً 20 میلی لیتر آگار بریزید.
مرحله 6. مهر و موم و ذخیره
صفحات آگار سرد و سفتشده را می توانید با استفاده از پارافیلم یا پوشش پلاستیکی آب بندی کنید. بشقابهای استفادهنشده را می توان تا زمان استفاده در یخچال نگهداری کرد.
نکته مهم:
استفاده از هود جریان آرام برای تولید صفحات آگار مفید است. محیطهای استریل به شدت مستعد آلودگی هستند. در صورت عدم وجود هود جریان، کلیه انتقالات استریل باید در یک فضای بسته با حداقل جریان هوا مانند حمام انجام شود.
برای تهیه انواع تجهیزات لازم میتوانید به فروشگاه هاگ مارکت مراجعه نمایید.
بررسی مشکلات کشت آگار
آگار در پرورش قارچ به منظور نگهداری اسپان قارچ برای استفاده طولانی مدت و ایجاد تک کشتهای عاری از آلودگی استفاده میشود.
ممکن است در هنگام استفاده از آن با مشکلات متعدد روبرو شوید. ما فهرستی از مشکلات احتمالی و روشهای برطرف کردن آن را برای شما آوردهایم تا بتوانید از ابتلا به آن جلوگیری کنید.
فهرست بررسی مشکلات کشت آگار به شرح ذیل می باشد:
مشکل | علت | راهکار |
سفت نشدن محیط کشت آگار | توزیع نامناسب اگار | همزدن کامل محیط کشت آگار قبل از ریختن داخل پتریدیش |
لبریز شدن آگار از ظرف | خروج زیاد بخار از اتوکلاو | قبل رسیدن فشار اتوکلاو به 1 پوند، سوپاپ را برندارید.
برای درزبندی منافذ اتوکلاو، لایه نازکی نخ نسوز و گریس استفاده شود تا بخار از اتوکلاو نشت نکند. |
شیوع آلودگی در پتری دیشها بعد از ریختن آگار و قبل از تلقیح | بالا بودن آلودگی محیط آزمایشگاه
نامناسب بودن روش آمادهسازی محیط کشت آلودگی اتوکلاو به بیماری باکتریایی |
ضدعفونی و پاستوریزاسیون آزمایشگاه بذر
خنک شدن اتوکلاو حاوی محیط کشت آگار در وضعیت استریل، قبل بازکردن درب استریل کردن اتوکلاو 48 ساعت در فشار 15 پوند |
عدم رشد هاگهای انتقال یافته | معیوب بودن نوع محیط کشت آگار
PH نامناسب هاگهای مسن یا خشکیده داغی چاقوی جراحی یا حلقه تلقیح قهوهای شدن شکر در محیط کشت آگار |
تهیه کشت مناسب
تنظیم PH مناسب محیط کشت آگار خیساندن هاگها برای 24 ساعت در آب استریل خنک کردن ابزار قبل از تماس با هاگ کاهش دما و فشار اتوکلاو تا حد مجاز |
بروز آلودگی اطراف نقطه تماس نشاء روی محیط آگار | آلودگی هاگ تلقیحشده
ابزار تلقیح استریل نباشد |
استفاده از هاگهای سالم و گرفتن بافت از نمونه تازهتر و کاملاً استریل
ابزارها قبل از استفاده اتوکلاو نمائید، به الکل آغشته و روی شعله بگیرید |
پنبهای شدن میسلیوم ریزومورفی و کاهش رشد و باردهی | استفاده از هاگ قارچ
عامل ژلهای ناکافی، سبب رشد زیرسطحی میسلیومها و ظاهر پنبهای میشود |
انتخاب بهترین نژاد
آگار باکیفیت بیفزایید، یا قبل از ریختن آن درون پتریدیش، آگار کاملاً هم زدهشود |
شکستن بطریهای اسپان، زمان بازشدن اتوکلاو | خنک شدن سریع اتوکلاو / تغییر ناگهانی دما
چیدن بطریها خیلی نزدیک بهم بطریهای معیوب یا ترکدار بطریهای نامناسب |
کاهش تدریجی دمای اتوکلاو
ایجاد فاصله بین بطریها جایگزینی بطریهای سالم تهیه بطریهایی باکیفیت |
درست کردن اگار پلیت
درست کردن اگار پلیت بسیار ساده است. می توانید پودر اگار را به صورت آمادهتهیه کنید.
برای تمام مراحل استریل می توانید از زودپز خانگی استفاده کنید. مایع اگار استریلشده بعد از خنک شدن سفت می شود. بنابراین باید قبل از اینکه کاملا حالت ژلاتینی پیدا کند به پلیت هایی که برای این منظور حاضر کردید انتقال دهید.
همچنین می توانید اگار پلیت اماده خریداری و استفاده کنید.
تولید مثل و نمونه گیری از قارچ تازه
ویدیو آموزش تولید مثل و نمونه گیری از قارچ تازه همراه ما باشید.
نمونه گیری از بافت قارچ تازه یا اصلاح نمونه ای از بافت میسلیومی که موجود داریم یکی از موارد بسیار پر کاربردی است که برای تمام دوستانی که به پرورش قارچ علاقه دارند، جالب است.
ممکن است در طبیعت یک گونه پیدا کنید یا نمونه ای داشته باشید که علاقمند باشیدخودتون از همین نمونه تولید کنید.
در این ویدیو از قارچ شیتاکه استفاده شدهاست ولی تفاوتی ندارد. شما می توانید از همین روش برای گونه کوبنسیس یا قارچ های جادویی هم استفاده کنید.
برای انجام نمونه گیری و اصلاح نمونه شما به هود لامینور یا انکیباتور و اگار پلیت نیاز دارید.
اگر در منزل هود لامینور ندارید با یک باکس داستکش دار هم میتوانید انتقال را انجام بدید.
مولف:
گردآوری، ترجمه و تحریر توسط تیم رسانه هاگ
کپی تنها با ذکر منبع مجاز است.
امید است مقاله بررسی مشکلات کشت آگار مورد توجه شما قرار گرفتهباشد. اگر نیازمند اطلاعات بیشتری در زمینه آموزش تولید و پرورش قارچ هستید میتوانید به همین بخش مراجعه نمایید.